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      受激發(fā)射損耗(STED)顯微鏡原理
      時(shí)間:2023-08-03 15:38來(lái)源:訊技光電作者: 技術(shù)部點(diǎn)擊:次打印
      摘要


                                                                         
      受激發(fā)射損耗(STED)顯微鏡描述了一種常用的技術(shù),以實(shí)現在生物應用的超分辨率。在這種方法中,兩束激光—一束正常,一束轉變成甜甜圈模式—被疊加到熒光樣品上。通過(guò)使用熒光過(guò)程的發(fā)射和損耗以及利用由此產(chǎn)生的飽和效應,與通常的顯微鏡技術(shù)(例如,寬視場(chǎng)顯微鏡)相比,后反射光顯示出更高的分辨率。在本文檔中,介紹了這種設備的基本設置。為了模擬飽和效應,在焦點(diǎn)區域采用等效孔徑。
       
      任務(wù)說(shuō)明                                                                           

       
      多重光源                                                                           
         

       
      螺旋相位板                                                                           

       
      探測器插件                                                                           

       
      參數運行 

                                                                               
       
      為了實(shí)現焦點(diǎn)區域的z-掃描,可以執行參數運行。使用此工具,用戶(hù)可以輕松改變整個(gè)光學(xué)系統的單個(gè)參數或一組參數。有關(guān)詳細信息,請參閱:
       
      Usage of the Parameter Run Document
                                                                                      
      非時(shí)序建模

                                                                             
       
      將通道配置模式切換設置為Manual Configuration后,用戶(hù)可以為系統中的每個(gè)表面指定為模擬打開(kāi)哪些通道。運行模擬時(shí),將對活動(dòng)光路進(jìn)行初步分析(通過(guò)所謂的Light Path Finder)。然后引擎將沿著(zhù)這些光路將場(chǎng)追蹤到系統中存在的探測器。
       
      Channel Setting for Non-Sequential Tracing
                                                                                      
      總結 – 組件…           

                                                                  


       
      系統觀(guān)感

                                                                       
       
       
      發(fā)射&損耗激光 

                                                                              
       
      光在焦點(diǎn)區域中的傳播表明,來(lái)自損耗激光的光會(huì )產(chǎn)生環(huán)形光斑,其中中心孔徑小于發(fā)射激光的焦斑。由于兩個(gè)光束在目標上的熒光過(guò)程中競爭,這導致信號激光的有效光束尺寸更小。
       
                                                                                      
      3D STED 輪廓

                     
                                                           
      注意:由于這個(gè)簡(jiǎn)化的例子不包括實(shí)際的熒光效應,我們?yōu)榱丝梢暬康膶蓚(gè)激光束進(jìn)行了歸一化。
       
      受激發(fā)射損耗效應                                                                          
       
      為了近似飽和損耗的影響,我們在焦點(diǎn)位置對發(fā)射激光的結果應用了孔徑效應?讖降膮荡笾禄趽p耗激光的焦點(diǎn)輪廓(600nm 直徑,25% 邊緣)。通過(guò)系統傳播回探測器平面表明,由于這個(gè)過(guò)程,光斑變得非常小。


       
      VirtualLab Fusion 技術(shù)                                                                          

                                                                                      
      文件信息 


       
      進(jìn)一步閱讀
      • Simulation of Multiple Light Source in VLF
      • Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy
       
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